Кудряшова Ирина Владимировна — сотрудник

доктор биологических наук

ФГБУН Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, лаборатория функциональной биохимии нервной системы, ведущий научный сотрудник

Соавторы:

Гуляева Н.В.,
Stepanichev M.Y.,
Тишкина А.О.,
Гуляева Н.В.,
Гуляева Н.В.,
Манолов А.И.,
Онуфриев М.В.

19 статей

Количество цитирований статей в журналах по данным

Web of Science: 71,

Scopus: 75

IstinaResearcherID (IRID): 282430137

Деятельность

• Статьи в журналах

  • • Individual variability of synaptic depression in the hippocampus of young male and female rats after neonatal pro-inflammatory stress

    • Kudryashova I. V.,

      Tishkina A.O.,

      Stepanichev M.Y.,

      Gulyaeva N.V.

    • в журнале European Neuropsychopharmacology, издательство Elsevier BV (Netherlands), том 29, с. 216-217

  • • 2020

      Пресинаптическая LTP в условиях блокады NMDA2B рецепторов

    • Кудряшова И.В.

    • в журнале Журнал высшей нервной деятельности им. И. П. Павлова, издательство Федеральное государственное унитарное предприятие Академический научно-издательский, производственно-полиграфический и книгораспространительский центр Наука (Москва), том 70, № 1, с.  115-124

  • • 2019

      Neonatal Proinflammatory Stress and Deficit of Induction of Long-Term Potentiation in the Hippocampus in Rats: Gender Differences

    • Kudryashova I.V.,

      Tishkina A.O.,

      Gulyaeva N.V.

    • в журнале Neuroscience and Behavioral Physiology, издательство Kluwer Academic/Plenum Publishers (United States), том 49, № 9, с. 1118-1126

      DOI

  • • 2019

      Relationship between long-term potentiation and the initial properties of CA3-CA1 synapses: importance for studies of the effects of external factors on hippocampal synaptic plasticity

    • Kudryashova I. V.

    • в журнале Neuroscience and Behavioral Physiology, издательство Kluwer Academic/Plenum Publishers (United States), том 49, № 5, с. 603-614

      DOI

  • • 2019

      The Molecular Basis of Destabilization of Synapses as a Factor of Structural Plasticity

    • Kudryashova I.V.

    • в журнале Neurochemical Journal, издательство Maik Nauka/Interperiodica Publishing (Russian Federation), том 13, № 1, с. 1-10

      DOI

  • • 2019

      Молекулярные основы дестабилизации синапсов как фактор структурной пластичности

    • Кудряшова И. В.

    • в журнале Нейрохимия, том 36, № 1, с. 3-13

  • • 2019

      Неонатальный провоспалительный стресс и созревание межклеточной коммуникации в гиппокампе

    • Кудряшова И.В.,

      Степаничев М.Ю.,

      Гуляева Н.В.

    • в журнале Журнал высшей нервной деятельности им. И. П. Павлова, издательство Федеральное государственное унитарное предприятие Академический научно-издательский, производственно-полиграфический и книгораспространительский центр Наука (Москва), том 69, № 6, с.  680-699

  • • 2018

      Неонатальный провоспалительный стресс и дефицит индукции долговременной потенциации в гиппокампе крыс: гендерные различия

    • Кудряшова И.В.,

      Тишкина А.О.,

      Гуляева Н.В.

    • в журнале Журнал высшей нервной деятельности им. И. П. Павлова, издательство Федеральное государственное унитарное предприятие Академический научно-издательский, производственно-полиграфический и книгораспространительский центр Наука (Москва), том 68, № 4, с. 524-536

  • • 2017

      Effects of individual stressors used in a battery of “chronic unpredictable stress” on long term plasticity in the hippocampus of juvenile rats

    • Gorbunova A. A.,

      Kudryashova I.V.,

      Manolova A.O.,

      Novikova M.R.,

      Stepanichev M.Yu,

      Gulyaeva N.V.

    • в журнале Acta Neurobiologiae Experimentalis, издательство Polska Akademia Nauk (Poland), том 77, с. 244-253

  • • 2017

      Neonatal proinflammatory stress induces accumulation of corticosterone and interleukin-6 in the hippocampus of juvenile rats: Potential mechanism of synaptic plasticity impairments

    • Onufriev M.V.,

      Freiman S.V.,

      Peregud D. I.,

      Kudryashova I.V.,

      Tishkina A.O.,

      Stepanichev M.Yu,

      Gulyaeva N.V.

    • в журнале Biochemistry (Moscow), издательство Pleiades Publishing, Ltd (Road Town, United Kingdom), том 82, № 3, с. 275-281

      DOI

  • • 2017

      Зависимость долговременной потенциации от исходных свойств СА3-СА1 синапсов: значение для исследования влияния внешних факторов на синаптическую пластичность гиппокампа

    • Кудряшова И.В.

    • в журнале Журнал высшей нервной деятельности им. И. П. Павлова, издательство Федеральное государственное унитарное предприятие Академический научно-издательский, производственно-полиграфический и книгораспространительский центр Наука (Москва), том 67, № 6, с. 831-846

  • • 2017

      “Unpredictable Stress”: Ambiguity of Stress Reactivity in Studies of Long-Term Plasticity

    • Kudryashova I.V.,

      Gulyaeva N.V.

    • в журнале Neuroscience and Behavioral Physiology, издательство Kluwer Academic/Plenum Publishers (United States), том 47, № 8, с. 948-959

      DOI

  • • 2016

      Neonatal proinflammatory challenge in male Wistar rats: Effects on behavior, synaptic plasticity, and adrenocortical stress response

    • Tishkina Anna,

      Stepanichev Mikhail,

      Kudryashova Irina,

      Freiman Sofia,

      Onufriev Mikhail,

      Lazareva Natalia,

      Gulyaeva Natalia

    • в журнале Behavioural Brain Research, издательство Elsevier BV (Netherlands), том 304, с.  1-10

      DOI

  • • 2016

      Непредсказуемый стресс”: неоднозначность стресс-реактивности при исследовании долговременной пластичности

    • Кудряшова И.В.,

      Гуляева Н.В.

    • в журнале Журнал высшей нервной деятельности им. И. П. Павлова, издательство Федеральное государственное унитарное предприятие Академический научно-издательский, производственно-полиграфический и книгораспространительский центр Наука (Москва), том 66, № 4, с. 414-428

  • • 2015

      Neurodegenerative changes in depression: Excitotoxicity or a deficit of trophic factors?

    • Kudryashova I. V.

    • в журнале Neurochemical Journal, издательство Maik Nauka/Interperiodica Publishing (Russian Federation), том 9, № 1, с. 1-7

      DOI

  • • 2015

      The plasticity of inhibitory synapses as a factor of long-term modifications

    • Kudryashova I.V.

    • в журнале Neurochemical Journal, издательство Maik Nauka/Interperiodica Publishing (Russian Federation), том 9, № 3, с. 159-168

      DOI

  • • 2015

      Использование парной стимуляции коллатералей Шаффера для количественного определения эффективности ГАМКергического торможения при экстраклеточной регистрации фокальных потенциалов в поле СА1 гиппокампа

    • Кудряшова И. В.

    • в журнале Журнал высшей нервной деятельности им. И. П. Павлова, издательство Федеральное государственное унитарное предприятие Академический научно-издательский, производственно-полиграфический и книгораспространительский центр Наука (Москва), том 65, № 2, с. 131-138

  • • 2015

      Нейродегенеративные изменения при депрессии: экзайтотоксичность или дефицит трофических факторов

    • Кудряшова И.В.

    • в журнале Нейрохимия, том 32, № 1, с. 5-12

  • • 2015

      Пластичность тормозных синапсов как фактор долговременных модификаций

    • Кудряшова И. В.

    • в журнале Нейрохимия, том 32, № 3, с. 181-191

отзывы пациентов, запись на приём, где принимает – Санкт-Петербург – НаПоправку

бесплатная гинекология теперь для меня закрыта

В жизни не встречала врачей отвратительнее Кудряшовой. Сейчас нашла уйму отзывов от тех, кто тоже выходил в слезах после её хамства и издевательств. Это, конечно, просто дичь, что у нас большинство гинекологов так себя ведут. Я перевелась в эту консультацию с Маяковского, потому что там просто «ведьмина гора» — Киселева, Начкебия – полный неадекват. Подруга говорила, что на Пестеля получше, рекомендовала Кудряшову как хорошего специалиста, хоть и со своеобразным характером и острым языком. Я знала, что моя подруга максимально неконфликтный и терпеливый человек, но только сейчас поняла, в какой степени, раз она смогла найти общий язык с [фрагмент отзыва удален модератором]. Я хотела запланировать беременность. На Маяковского Начкебия отправила сдавать кучу всего того, что можно сделать бесплатно, в Медлаб (я так поняла, она сотрудничает с ними), от невинной уреаплазмы назначила пить 3 антибиотика 3 недели, для обследования мужа дала телефон своего знакомого врача, отметив, что придется раскошелиться. Вообще сменить консультацию не так просто, надо попасть к заведующей старой консультации, потом к заведующей новой, и только потом ты можешь записаться к врачу. Кудряшова с порога начала требовать у меня назвать жалобы (а их у меня не было), историю про уреаплазму слушать не хотела, да и вообще затыкала постоянно, чтобы я не мешала ей печатать. Предложила снова сдать мазки (хотя у меня на руках были совсем недавние с Маяковского), на мои возражения устроила агрессивный разнос, тыкала в лицо подписанным мною согласием на вмешательство. Но узнав, что у меня месячные, сама передумала проводить осмотр. На пустом месте пререкались почти час, я расплакалась, она еще больше стала гнобить за неадекват и психичность, записала к их штатному психологу. Конечно, я никуда не пошла, переступать порог этого учреждения не хотелось больше. Прошло несколько месяцев, беременность не наступала. Я узнала, что в ЖК есть кабинет планирования семьи, где могут с этим помочь. И – о невезение – этим «планировщиком» является как раз Кудряшова. Но куда деваться-то. Пришла, она приняла меня на этот раз дружелюбно: «Ну что, ты успокоилась?» Расписала, что и как надо сдать, чтобы проверить детородную функцию. Проверку проходимости труб настойчиво предлагала сделать платно в Медике («обязательно позвонив туда именно по этому мобильному номеру»), а не ждать 2 месяца на Комсомола, я и правда пошла в Медику платно, правда, в обход «нужного» мобильного. Манипуляция стоила около 9 тысяч, перед ней еще пришлось прилично побегать с анализами (две крови, моча, мазок, посев – все это нужно для ГСГ). Еще Кудряшова направила к маммологу, а поскольку таковых у нас нет в поликлинике, я была у обычного онколога, которая нащупала в груди «что-то ужасное», правда, потом узист опроверг. А еще Кудряшова послала к эндокринологу, которая оказалась тоже не сильно профессиональной, из-за небольшого повышения пролактина отправила на МРТ гипофиза за кучу денег, написала «аденома гипофиза», назначила гормоны, направила в Алмазова, где еще раз сдали пролактин, он был в норме, подивились на зря сделанную МРТ и ненужные таблетки и отправили обратно к Кудряшовой, чтобы та проверила половые гормоны и помогла с отслеживанием овуляции по УЗИ. Вот сегодня я пришла к ней. Она с порога спросила: «Ну что не настроила ты себя на то, чтоб забеременеть? Неправильно, значит, ты себя запрограммировала!» Результаты исследований посмотрела бегло, сказала, что больше ничем помочь не может: «Пытайтесь еще полтора года, а потом приходите, как раз у тебя полтора года осталось до «опасного» возраста в 35 лет. Попытки забеременеть делайте каждый день!» Я возразила, что каждый день у нас не получается, мы более 8 лет вместе, получается реже. Она несколько раз повторила: «надо жить открытой половой жизнью!» — я не очень поняла, почему открытой. Я посетовала, что пришлось пройти столько врачей и потратить денег, попросила ее дать направление на кровь и УЗИ. Она сказала, что талоны на УЗИ в дефиците, за ними нужно прийти через 2 недели, может, удастся попасть на март. Я предупредила, что номерков к ней нет, и мне придется прийти за талоном без записи. И тут у нее что-то щелкнуло: «Так я же ни разу не смотрела тебя в кресле! Ну вот. А вдруг у тебя рак шейки матки!» Я ответила, что приносила ей мазки на онкоцитологию (все в норме) в предыдущие приемы. Она ответила, что раз их копии нет в карте, значит, может быть рак. Она вспомнила, как я «отказалась» от осмотра в первую нашу встречу, стала меня за это гнобить. Я настаивала, что моей вины в отсутствии осмотра нет, что так резко говорить о раке нехорошо, упомянула, что совсем недавно нашли тяжелый рак у моего отца, и это сейчас больная тема. Кудряшова не останавливалась, повторяла про рак. Сказала, что по мне видно, что у меня проблемы с психикой и с мужем, что я не пришла тогда к психологу лишний раз это доказывает. Называла меня на «ты» и по фамилии. Я вообще заметила у нее странную склонность называть саму себя и пациента в третьем лице. «Иванова не хочет обследоваться, а Кудряшова виновата». Я спросила, считает ли она нормальным так резко разговаривать и обращаться по фамилии. Она немного сдала позиции, стала называть меня по имени (правда, Мариной вместо Марии, ну да ладно). Но ее профессиональное умение довести уже сделало своё дело, я заплакала. Черт возьми, я бывала у множества врачей, сейчас хожу по врачам с отцом, ситуации бывают разные, я человек эмоциональный, да, но за всю жизнь я ревела у врача 2 раза – и оба у этой дряни! Я ушла, хлопнула дверью, на лестнице меня поймала женщина из регистратуры и очень ласково пыталась успокоить, по ее реакции я поняла, что от Кудряшовой так выходит каждая вторая пациентка. И вот вроде ничего такого совсем дикого Кудряшова мне не сказала, но я уже несколько часов в ужасном состоянии, как у нее так получается? Она говорила, что у нее включен диктофон в кармане. Как жаль, что я не включила тоже, хотя перед приемом была такая мысль. Она сказала мне перевестись обратно в «свою» консультацию: «Зачем вообще ты к нам прилепилась?» Я ответила: «Какой смысл обратно? Там такие же ведьмы, как и вы!» Кажется, бесплатная гинекология теперь для меня закрыта, хотя в платных тоже хрен найдешь нормального врача. Вот тут в тексте и комментариях описано, насколько это системная проблема, и Кудряшова — лишь один из [фрагмент отзыва удален модератором] этого ада https://pikabu.ru/story/karatelnaya_ginekologiya_6309798

Ирина Кудряшова_on Bears and Buds Online Журнал Teddy Bear

Зеленый чай   Мончер Достаточно взглянуть в глаза любому творению Ирины Кудряшовой, чтобы убедиться, что она видит мир по-особому. Воронеж, Россия, был домом Ирины с самого начала. Здесь она выросла, пошла в школу, вышла замуж и живет до сих пор. Искусство всегда привлекало Ирину, и она продолжила свое образование в Воронежской академии.   «Всю жизнь рисую картинки и вяжу. Но самое главное, что я шью — это мишки.»   Вначале Ирина занималась только вязанием спицами и на мастер-классе опубликовала несколько выкроек одежды.   «Меня не очень привлекала жизнь, связанная только с вязанием, и поэтому Я начала создавать игрушки из шерсти. Это было очень увлекательно.»   Она рано начала шить медведей, используя свои навыки вязания. Она вязала платья и пальто для своих мишек, на которых рисовала свои работы.   «Меня очень привлекала шерсть. Я думаю, что это очень благородный материал, и его легко стелить.» В конце концов, исследуя свои таланты, она занялась изготовлением кукол. «Это вдохновило меня на работу с художницей по куклам по имени Дебора Поуп. Увидев ее работы, я решила, что могу создать «шерстяную» куклу». Затем она начала валять кукол. Вскоре Ирина поняла, что куклы — это «живые существа и требуют серьезных отношений, к которым я была не готова». В ее глазах куклы требовали большей «серьезности», чем она могла себе представить. Она обратила внимание на свою любовь к медведям.     «Честно говоря, в детстве у меня не было мишек. Куклы были, а мишек не было.»   Хотя она и интересовалась плюшевыми мишками, но только после того, как купила плюшевая собака, которую она осознала, какую неописуемую радость она могла получить от чего-то такого пушистого. и милый. «Купила искусственный мех и начала изучать техники. Не могу сказать, что с первого раза получилось сделать шедевр. Неправильно вставила лапу!» Из Конечно, сейчас она может смеяться над этим, но тогда было пролито много слез.   Со временем она добилась желаемых результатов, которые были далеки от ее первоначального медведя с пришитыми задом наперед ногами.   Ирина очень серьезно относилась к изготовлению мишек и училась день и ночь, придумывая свои собственные выкройки и просматривая каждое изображение медведя, которое она могла найти.   Благодаря своим навыкам работы с шерстяными волокнами она поняла, что может делать свои творения из различной шерсти и создавать очень уникальных мишек и бутоны; от котят до ёжиков, от зайчиков до щенков.   «Выражение глаз, улыбки, у каждого из них свой характер и, следовательно, своя жизнь.»   После двух лет шитья плюшевых мишек и их друзья, у Ирины появилось много новых друзей и преданных коллекционеров. При поддержке мужа и сына она может раскрыть свои многочисленные таланты и воплотить в жизнь свои творения. «Все мои успехи меня очень радуют.»   Это радует и нас! Диана Боня и Моня             Ирина Кудряшова Игрушки Ирины Участников с июля 2013 г.   Мать и ёжик Джентльмен Ягода Американский кокер-спаниель Миа Егор       Узнайте о Веронеж, Россия       Нажмите на карту >>>

Коллекционеры, годовая подписка на Bears&Buds стоит всего 15 долларов, и вы получите пароль для входа на страницы коллекционеров. Художники, станьте участником Bears&Buds уже сегодня! Рекламируйте БЕСПЛАТНО! Пароль перенесет вас в раздел B2B, наполненный идеями о продажах, создании и практическом использовании. Главная  •  Свяжитесь с нами  • Объявления • Присоединяйтесь к Bears&Buds

Регуляция комплекса М-кадгерин-бета-катенин с помощью кальпаина 3 на терминальных стадиях миогенной дифференцировки

. 2006 ноябрь; 26 (22): 8437-47.

doi: 10.1128/MCB. 01296-06.

Epub 2006, 18 сентября.

Ирина Крамерова
¹
, Елена Кудряшова, Бенджамин Ву, Мелисса Дж. Спенсер

принадлежность

• ¹ Кафедра неврологии, Медицинская школа Дэвида Геффена, Неврологический исследовательский корпус, Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе, Лос-Анджелес, Калифорния

  -7334, США. [email protected]

• PMID:

  16982691

• PMCID:

  PMC1636794

• DOI:

  10.1128/МКБ.01296-06

Бесплатная статья ЧВК

Ирина Крамерова и др.

Мол Селл Биол.

2006 ноябрь

Бесплатная статья ЧВК

. 2006 ноябрь; 26 (22): 8437-47.

doi: 10.1128/MCB.01296-06.

Epub 2006, 18 сентября.

Авторы

Ирина Крамерова
¹
, Елена Кудряшова, Бенджамин Ву, Мелисса Дж. Спенсер

принадлежность

• ¹ Кафедра неврологии, Медицинская школа Дэвида Геффена, Неврологический исследовательский центр, Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе, Лос-Анджелес, Калифорния

  -7334, США. [email protected]

• PMID:

  16982691

• PMCID:

  PMC1636794

• DOI:

  10. 1128/МКБ.01296-06

Абстрактный

Цистеиновая протеаза кальпаин 3 (CAPN3) необходима для нормальной функции мышц, поскольку мутации в CAPN3 вызывают поясно-конечностную мышечную дистрофию типа 2А. Ранее мы показали, что миобласты, выделенные от мышей с нокаутом CAPN3 (C3KO), способны сливаться с миотрубками; однако образование саркомеров было нарушено. В этом исследовании мы дополнительно охарактеризовали морфологические и биохимические особенности миотрубочек C3KO, чтобы выяснить роль CAPN3 во время миогенеза. Мы показали, что прекращение клеточного цикла происходит нормально в культурах C3KO, но миотрубочки C3KO имеют повышенное количество миоядер на миотрубку. Мы обнаружили, что CAPN3 действует во время миогенеза, специфически контролируя уровни ассоциированного с мембраной, но не цитоплазматического бета-катенина и М-кадгерина. CAPN3 был способен расщеплять оба белка, и в отсутствие CAPN3 М-кадгерин и бета-катенин аномально накапливались на мембранах мышечных трубочек. Учитывая роль M-cadherin в слиянии миобластов, это открытие указывает на то, что избыточный миоядерный индекс миотрубочек C3KO был обусловлен усилением слияния. События после слияния, такие как экспрессия интегрина бета1D и миофибриллогенез, были подавлены в миотубах C3KO. Эти данные свидетельствуют о том, что сохранение слияния, наблюдаемое в клетках C3KO, ингибирует последующие этапы дифференцировки, такие как перестройки интегриновых комплексов и сборка саркомеров.

Цифры

РИС. 1.

Миотрубочки C3KO имеют увеличенную…

РИС. 1.

Миотубы C3KO имеют увеличенное количество и аномальное распределение миоядер. Трехдневный WT…

ИНЖИР. 1.

Миотубы

C3KO имеют увеличенное количество и аномальное распределение миоядер. Трехдневные миотрубочки WT (B, D) и C3KO (A, C, E-G) окрашивали DAPI для визуализации ядер. В некоторых миотрубках C3KO ядра накапливались в одном домене миотрубки (скобка на панели А). Некоторые мышечные трубки легко отделялись и образовывали круглые ядерные скопления (стрелки на панелях E и F). Очень крупные мышечные трубки можно найти в культурах C3KO (G, H). Те же миотрубочки дважды окрашивали DAPI (G) для визуализации ядер и антител против тяжелой цепи эмбрионального миозина (eMHC) (H), чтобы очертить форму миотрубочки. (I) Распределение миотрубочек с разным количеством ядер в культурах C3KO и WT.

РИС. 2.

Выход из клеточного цикла происходит нормально…

РИС. 2.

Выход из клеточного цикла обычно происходит в культуре C3KO. (A) Вестерн-блоттинг показал…

ИНЖИР. 2.

Выход из клеточного цикла обычно происходит в культуре C3KO. (A) Вестерн-блот-анализ показал, что ожидаемое снижение концентрации PCNA происходило сходным образом в культурах C3KO и WT после того, как их переводили со среды для роста (GM) на среду для дифференцировки (DM) на 24 или 48 часов. KO1 и KO2, две первичные культуры миобластов C3KO; WT, первичная культура миобластов WT. ВТ мышь. (B) Миобласты WT и C3KO и 2-дневные миотрубки окрашивали антителами против PCNA и DAPI для визуализации ядер. В то время как окрашивание PCNA было очевидным как в миобластах C3KO, так и в миобластах WT, в 2-дневных миотрубках не было обнаружено PCNA-позитивных ядер.

РИС. 3.

Связанные с мембраной β-катенин и М-кадгерин…

РИС. 3.

Связанные с мембраной β-катенин и М-кадгерин сильно повышены в миотубах C3KO. (А) Всего…

ИНЖИР. 3.

Связанные с мембраной β-катенин и М-кадгерин сильно повышены в миотубах C3KO. (A) Общая концентрация β-катенина в 3-дневных экстрактах миотрубочек C3KO незначительно выше, чем в соответствующих экстрактах миотрубочек WT. Использовали две культуры WT (WT 1 и WT2) и две культуры C3KO (KO1 и KO2). 9Ось 0431 и на графике показывает произвольные единицы отношения между сигналом вестерн-блоттинга и красным сигналом Понсо (нагрузка белком) для каждой дорожки. (B) Фракционирование 3-дневных миотрубочек проводили, как описано ранее (36) (см. также «Материалы и методы»). В то время как в ядерной (ядерной) и цитозольной (цитозолевой) фракциях уровни β-катенина в клетках C3KO сходны с таковыми в клетках дикого типа, мембраносодержащих Тритон Х-100-растворимый и особенно Тритон Х-100-нерастворимый фракции клеток C3KO содержат гораздо больше β-катенина, чем соответствующие фракции WT. Окрашивание Ponceau вестерн-блоттинга показано как контроль загрузки геля, а окрашивание мембранным белком дисферлином показано как контроль фракционирования. Обратите внимание, что уровни дисферлина могут не отражать общую концентрацию белка в данной фракции, поскольку сообщалось о вторичном снижении уровня дисферлина у некоторых пациентов с кальпаинопатией и наоборот (1, 13). TX-sol., Тритон Х-100-растворимая фракция; ТХ-инсол, Тритон Х-100-нерастворимая фракция. (C) Концентрация М-кадгерина увеличена в миотубках C3KO по сравнению с миотубами WT. Нижняя панель показывает окрашивание Ponceau вестерн-блоттинга.

РИС. 4.

Накопление β-катенина в…

РИС. 4.

Накопление β-катенина на мембранах 3-дневных миотрубочек C3KO. Иммуноокрашивание 3-дневных…

ИНЖИР. 4.

Накопление β-катенина на мембранах 3-дневных миотрубочек C3KO. Иммуноокрашивание 3-дневных миотрубочек выявило присутствие β-катенина, связанного с М-кадгерином, в сарколеммах 3-дневных C3KO, но не в миотрубках дикого типа (стрелки).

РИС. 5.

И β-катенин, и М-кадгерин…

РИС. 5.

И β-катенин, и М-кадгерин являются субстратами для протеазы CAPN3. β-катенин (А) и М-кадгерин…

ИНЖИР. 5.

И β-катенин, и М-кадгерин являются субстратами для протеазы CAPN3. β-катенин (А) и М-кадгерин (В) расщепляются с помощью CAPN 3, когда белки коэкспрессируются в клетках насекомых. β-катенин (β-cat) и цитоплазматическая часть M-кадгерина (M-cad) экспрессировались в виде белков слияния с C-концевыми эпитопами V5 и N-концевыми 6xHis. Рекомбинантные белки экспрессировались либо отдельно, либо коэкспрессировались с полноразмерным кальпаином 3 (+CAPN3) или с изоформами сплайсинга, в которых отсутствовал экзон 6 (+EX6-) или экзоны 15 и 16 (+EX15,16-). Было показано, что обе сплайс-изоформы экспрессируются в клетках, подвергающихся миогенезу (22). CAPN3 с C129Мутация S (+C129S), полностью устраняющая ферментативную активность, использовалась в качестве отрицательного контроля. Активные формы CAPN3 подвергаются автолизу с образованием фрагмента приблизительно 55 кДа (звездочки на дорожках +CAPN3 и +EX15,16 ^— на панели A). Экзон 6 ^— не подвергается автолизу из-за делеции двух из трех сайтов автолитического расщепления, расположенных в экзоне 6 (29). Обратите внимание, что β-catenin и M-cadherin могут быть расщеплены только полноразмерным CAPN3, но не его сплайс-формами. Загрузка геля., Загрузка геля. (C) CAPN3 присутствует как в цитозольной, так и в Triton X-100-нерастворимой фракциях мембран взрослой мышцы. Экстракты камбаловидной мышцы мышей C3KO и WT фракционировали (см. Материалы и методы) и окрашивали вестерн-блоты антителом против CAPN3. Хотя основной пул CAPN3 присутствует в цитозольной фракции, более длительное воздействие позволило обнаружить CAPN3 во фракциях мембран мышц WT. ТХ-инсол, Тритон Х-100-нерастворимая фракция.

РИС. 6.

Замена интегрина β1A на…

РИС. 6.

Замена интегрина β1A интегрином β1D не происходит должным образом в C3KO…

ИНЖИР. 6.

Замена интегрина β1A интегрином β1D не происходит должным образом в миотубках C3KO; однако внутриклеточные домены интегринов β1A или β1D не являются субстратами для CAPN3. (A) Вестерн-блоты 3-дневных миотрубок окрашивали антителами, которые специфически распознают интегрины β1A или β1D. Уровень интегрина β1D значительно ниже в миотрубках C3KO, чем в миотрубках дикого типа. На другие компоненты интегринового комплекса (такие как винкулин и талин) отсутствие CAPN3 не влияет (нижние панели). Окрашивание десмином показано как маркер миогенных клеток в этих первичных культурах. Использовали две культуры C3KO (KO1 и KO2) и две культуры WT (WT1 и WT2). (B) Чтобы исследовать возможность того, что интегрин β1 также может быть субстратом для протеазы CAPN3, внутриклеточные домены изоформ β1A и β1D были экспрессированы в клетках насекомых в виде слитых белков с метками эпитопов V5 и His. (C) Коэкспрессия внутриклеточных доменов интегринов β1A и β1D с полноразмерным CAPN3 или его изоформами сплайсинга в клетках насекомых не выявила расщепления интегрина CAPN3. В этих экспериментах использовали антитела, специфичные к эпитопной метке (верхние панели), а также антитела, специфичные к изоформе интегрина β1 (нижние панели).

РИС. 7.

Количество миоядер в…

РИС. 7.

Количество миоядер в волокнах мышей C3KO выше, чем у…

ИНЖИР. 7.

Количество миоядер в волокнах мышей линии C3KO выше, чем у соответствующих по полу и возрасту контрольных мышей дикого типа. (A) В таблице показаны средние площади поперечного сечения (XSA) и количество миоядер на 100 миофибрилл в камбаловидной мышце. В этом эксперименте использовали четырех 6-месячных самцов C3KO и WT. (B) Срезы средней части живота каждой камбаловидной мышцы окрашивали антителами против дистрофина и DAPI для идентификации ядер, расположенных внутри миофибрилл (стрелки). (C) Среднее количество миоядер на 10 000 мкм ² был значительно выше в мышцах C3KO, чем в мышцах WT.

См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC

Похожие статьи

• Ослабленное высвобождение Ca(2+) в мышиной модели мышечной дистрофии пояса конечностей 2А.

  ДиФранко М., Крамерова И., Вергара Дж. Л., Спенсер М.Дж.
  ДиФранко М. и др.
  Скелетная мышца. 2016 24 фев; 6:11. дои: 10.1186/s13395-016-0081-й. Электронная коллекция 2016.
  Скелетная мышца. 2016.

  PMID: 26913171
  Бесплатная статья ЧВК.

• Неспособность активировать транскрипцию генов, необходимых для адаптации мышц, лежит в основе поясно-конечностной мышечной дистрофии 2А (кальпаинопатии).

  Крамерова И., Ермолова Н., Эскин А., Хевенер А., Квенбергер О., Армандо А.М., Халлер Р., Ромен Н., Нельсон С.Ф., Спенсер М.Дж.
  Крамерова И. и др.
  Хум Мол Жене. 2016 1 июня; 25 (11): 2194-2207. DOI: 10.1093/hmg/ddw086. Epub 2016 22 марта.
  Хум Мол Жене. 2016.

  PMID: 27005420
  Бесплатная статья ЧВК.

• Нулевая мутация кальпаина 3 (p94) у мышей вызывает аномальное образование саркомеров in vivo и in vitro.

  Крамерова И., Кудряшова Е., Тидбол Дж.Г., Спенсер М.Дж.
  Крамерова И. и др.
  Хум Мол Жене. 2004 г., 1 июля; 13 (13): 1373-88. дои: 10.1093/hmg/ddh253. Epub 2004 11 мая.
  Хум Мол Жене. 2004.

  PMID: 15138196

• Calpain 3, «привратник» правильной сборки, оборота и обслуживания саркомера.

  Бекманн Дж.С., Спенсер М.
  Бекманн Дж. С. и соавт.
  Нервно-мышечное расстройство. 2008 Декабрь; 18 (12): 913-21. doi: 10.1016/j.nmd.2008.08.005. Epub 2008 29 октября.
  Нервно-мышечное расстройство. 2008.

  PMID: 18974005
  Бесплатная статья ЧВК.

  Обзор.

• Механизмы, регулирующие слияние миобластов: многоуровневое взаимодействие.

  Лехка Л., Рендович М.Ю.
  Лека Л. и др.
  Semin Cell Dev Biol. 2020 авг;104:81-92. doi: 10.1016/j.semcdb.2020.02.004. Epub 2020 13 февраля.
  Semin Cell Dev Biol. 2020.

  PMID: 32063453

  Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Текущие и будущие терапевтические стратегии при мышечной дистрофии пояса конечностей типа R1: клинические и экспериментальные подходы.

  Шахин И.О., Озкул Ю., Дюндар М.
  Шахин И.О. и др.
  Патофизиология. 2021 18 мая; 28 (2): 238-249. doi: 10.3390/pathophysiology28020016.
  Патофизиология. 2021.

  PMID: 35366260
  Бесплатная статья ЧВК.

  Обзор.

• CAPN3: специфический для мышц кальпаин, играющий важную роль в патогенезе заболеваний (обзор).

  Чен Л., Тан Ф., Гао Х., Чжан С., Ли С., Сяо Д.
  Чен Л. и др.
  Int J Mol Med. 2021 ноябрь;48(5):203. дои: 10.3892/ijmm.2021.5036. Epub 2021 22 сентября.
  Int J Mol Med. 2021.

  PMID: 34549305
  Бесплатная статья ЧВК.

  Обзор.

• Низкомолекулярный подход к восстановлению медленного окислительного фенотипа и дефектной передачи сигналов CaMKIIβ при мышечной дистрофии пояса конечностей.

  Лю Дж., Кампанья Дж., Джон В., Дамуазо Р., Мохонова Э., Бесерра Д., Мэн Х., МакНалли Э.М., Пайл А.Д., Крамерова И., Спенсер М.Дж.
  Лю Дж. и др.
  Сотовый представитель Мед. 20 октября 2020 г.; 1(7):100122. doi: 10.1016/j.xcrm.2020.100122. Электронная коллекция 2020 20 октября.
  Сотовый представитель Мед. 2020.

  PMID: 33205074
  Бесплатная статья ЧВК.

• Механизмы кальция при конечностно-поясной мышечной дистрофии с мутациями CAPN3 .